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    如何正確操作使用355618BECKMAN超速離心管?

    點擊次數:21 發布時間:2022-09-05
      355618BECKMAN超速離心管的滅菌是用10%的過氧化氫浸泡,福爾馬林也適合所有的離心管但不太安全。70%的乙醇適用于PA和PP和PET管,水沸滅菌適合PA和PP管。環氧乙烷適合PC管。高溫高壓滅菌法,115℃、30min適合PA、PP和PC材料的離心管,但是PC材料的使用壽命將受限制;121℃、20min適合PA和PP管,126℃、15min均不適合任何離心管。此外,離心管在紫外下無法滅菌。
     
      355618BECKMAN超速離心管操作中需要注意如下問題:
     
      (1)建議使用幼嫩的材料,材料含水量大時,可用70%乙醇擦拭,蒸餾水稍沖洗后用濾紙吸干,于液氮中研磨。如果材料量大(20g以上),或所用的植物材料較老,或材料含有較多的酚類物質,應提高β-巰基乙醇的用量。
     
      (2)氯仿抽提時,要保證抽提液中有一定的鹽濃度,否則DNA進入沉淀。
     
      (3)CTAB溶液在15℃以下會沉淀,因此離心和其他操作時不可在低溫下進行。
     
      (4)加入沉淀緩沖液應在高于15℃的室溫下沉淀,如果室溫適宜,沉淀時間足夠而無沉淀出現,可能是鹽濃度高,這時可再加入沉淀緩沖液降低鹽濃度。離心收集CTAB沉淀緩沖液沉淀的DNA時,不能離心過度,高速度及長時間的離心都會使沉淀過緊,而再溶解困難。
     
      (5)采用真空抽干沉淀時,不能抽得太干抽得太干會使DNA斷裂,也可不采用真空抽干,將離心管置通風柜或超凈工作臺中令乙醇自然蒸干,這樣對DNA造成的損傷小。
     
      (6)10%的CTAB溶液很粘滯,取液時可將其加熱至56℃。
     
      (7)轉移DNA溶液用的槍頭要剪去尖,避免對DNA的機械損傷。
     
      (8)所得DNA應為白色或灰白色,若呈褐色則有多酚物質污染。對于含多酚類物質多的材料,提取緩沖液中可加入1%的PVP。對于多糖含量高的材料,提取液中CTAB的濃度可增至3%或更高。

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